间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒概述
尊龙凯时推出的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,货号为YJ-MSCYD-004,规格包括100ml和200ml,价格分别为12800元。该产品经过团队精心优化,旨在显著增强间充质干细胞向成脂细胞的分化能力。请注意,本产品仅供科研使用,禁止用于诊断、治疗、临床或家庭用途。产品组成与保存条件
本试剂盒的主要成分及其保存条件如下:- 诱导分化添加剂Ⅰ: 5mL/10mL,保存于-20℃,有效期1年。
- 诱导分化添加剂Ⅱ: 01mL/02mL,保存于-20℃,有效期1年。
- 优质胎牛血清: 10mL/20mL,保存于-20℃,有效期1年。
- 细胞基础培养基: 85mL/170mL,保存于4℃,有效期1年。
- 油红O染色液: 5mL/10mL,保存于4℃避光,有效期1年。
注意:为保障产品有效性,请避免反复冻融。配制好的诱导培养基应保存于2-8℃,有效期为2周,请根据实验需求合理配制。
产品使用说明
1. 成脂诱导分化完全培养基的配制
在室温下融化各因子及血清后,进行瞬时离心,使溶液集中于离心管底部。若因子或血清中出现沉淀,属于正常现象,无需过滤,以免丢失成分。根据实验需要于无菌操作台中配制诱导分化完全培养基,建议每次配制50mL,配制比例见下表:
试剂成分 | 配制比例 | 50mL配制体系 |
---|---|---|
诱导分化添加剂Ⅰ | 5% | 25mL |
诱导分化添加剂Ⅱ | 0.1% | 50μL |
优质胎牛血清 | 10% | 5mL |
细胞基础培养基 | 85% | 425mL |
2. 成脂诱导分化实验步骤
建议选择第3~5代、纯度达90%以上、状态良好的间充质干细胞。将其消化后离心收集,并用含10% FBS的完全培养基调整细胞密度,均匀铺于培养瓶/板中,置入37℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中进行培养。待细胞汇合度达80%~100%时,进行诱导分化。
小心吸弃细胞培养上清,沿孔壁缓慢加入提前配制的诱导分化完全培养基,培养于37℃的恒温细胞培养箱中。每2~3天更换新鲜的诱导分化完全培养基,并根据细胞状态缩短换液周期。诱导3周后,可进行油红O染色鉴定。
3. 油红染色分析
诱导分化结束后,小心吸弃细胞培养上清,并用1×PBS洗涤1~2次。加入适量细胞固定液,室温下固定30分钟。随后配制油红O工作液,并用滤纸过滤以备使用。细胞固定完成后,再用1×PBS洗涤2次,沿孔壁加入油红O工作液,室温下染色30分钟。
最后,吸出染色液,PBS洗涤以去除多余的浮色,并在显微镜下观察细胞染色效果,确认细胞内油滴着色为红色。注意,油红O工作液不可重复使用。